Bioensayos en farmacología experimental y preclínica

Título original:

Bioassays in Experimental and Preclinical Pharmacology

Contenido del libro:

1.Visión general

2.Ensayos de cultivo celular

2. 1 Ensayo del Ciclo Celular: Marcaje con Yoduro de Propidio.

2. 2. Ensayo de apoptosis: Annexin V/Propidium Iodide Marking.

2. 3 Citotoxicidad en células Caco-2 por el método del azul Alamar.

2. 4 Viabilidad en células Caco-2 estimuladas con lipopolisacárido (LPS).

2. 5 Determinación de óxido nítrico (NO) mediante experimento in vitro.

2. 6 Análisis de citotoxicidad específica frente a RAW 264. 7 para la determinación de la actividad antiinflamatoria in vitro.

2. 7 Rascado de células de fibroblastos (ensayo de rascado).

2. 8 Evaluación de la respuesta inflamatoria in vitro en células AGS.

3.Análisis fitoquímico

3. 1 Ensayos fitoquímicos preliminares.

3. 2 Análisis cuantitativo de metabolitos secundarios.

3. 3 Análisis por cromatografía en capa fina.

3. 4 Análisis por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).

3. 5 Espectrometría de masas.

3. 6 Análisis por espectrometría de masas por ionización de electrospray (ESI-MS).

3. 7 Identificación de compuestos fenólicos por HPLC-LC-ESI- MS/MS.

3. 8 Determinación cuantitativa del contenido total de alcaloides por HPLC.

3. 9 Determinación cuantitativa del contenido de alcaloides totales por HPLC.

4. Cálculo de dosis de fármacos preclínicos

4. 1 Conversión basada en la normalización dosis-superficie corporal.

4. 2 Determinación de la dosis equivalente animal.

5.Estudios toxicológicos (in vitro e in vivo).

5. 1 Evaluación de la citotoxicidad mediante azul Alamar.

5. 2 Ensayo de micronúcleos.

5. 3 Ensayo cometa.

5. 4 Efecto sobre el ciclo celular.

5. 5 Estudio de toxicidad aguda in vivo.

5. 6 Toxicidad subcrónica (dosis repetidas).

6.Procedimiento estándar para la anestesia en experimentos preclínicos.

6. 1 Planificación y cuidados anestésicos.

6. 2 Procedimiento previo.

6. 3 Procedimiento experimental.

7.Consideraciones generales y extracción de sangre animal.

7. 1 Extracción de sangre venosa.

7. 2 Extracción de sangre de la vena caudal.

7. 3 Extracción de sangre por punción cardíaca.

7. 4 Vena cava posterior.

7. 5 Seno orbitario.

8.Experimentos con animales en el sistema cardiovascular

8. 1 Obtención de señales de electrocardiograma (ECG) y presión arterial (PA).

8. 2 Inducción de isquemia miocárdica.

9.Experimentos con animales sobre la colitis ulcerosa.

9. 1 Colitis ulcerosa inducida por ácido 2,4,6-trinitrobencenosulfónico (TNBS).

9. 2 Colitis ulcerosa crónica inducida por sulfato sódico de dextrano (SSD) al 2%.

9. 3 Colitis con recidiva (Crónica)

10.Experimentos sobre actividades antibacterianas.

10. 1 Actividad antibacteriana mediante ensayos in vitro.

10. 2 Experimentos con animales sobre la actividad antibacteriana.

11.Experimentos sobre actividades antifúngicas.

11. 1 Método de difusión en disco de agar.

11. 2 Concentración inhibitoria mínima (CIM)

11. 3 Prueba del sorbital.

11. 4 Ensayo de Neurospora crassa.

11. 5 Efecto del Ergosterol sobre la CMI.

11. 6 Ensayo de Β.

1,3-D-Glucano Sintasa (GS)

11. 7.