Técnicas del calcio: Manual de laboratorio

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Título original:

Calcium Techniques: A Laboratory Manual

Contenido del libro:

La vida comienza con una oleada de iones de calcio (Ca2+) en el momento de la fecundación y, a partir de entonces, la señalización del Ca2+ influye en casi todos los aspectos del desarrollo y la fisiología de los mamíferos, desde la expresión génica y la proliferación celular hasta la contracción muscular y los impulsos nerviosos. Para crear señales de Ca2+ diferenciadas espaciotemporalmente, las células utilizan diversos mecanismos para reconocer, transportar y amortiguar el Ca2+. Así pues, se necesita una amplia gama de técnicas experimentales fiables para estudiar el movimiento del Ca2+ y los diversos efectores implicados.

Este manual de laboratorio proporciona protocolos paso a paso para estudiar muchas facetas de la señalización de Ca2+, así como información de fondo sobre los principios y aplicaciones de las técnicas. Los colaboradores discuten cómo utilizar sondas de Ca2+ fluorescentes, luminiscentes y genéticamente codificadas junto con las modalidades de imagen más avanzadas para caracterizar las señales de Ca2+. Se describen medidas electrofisiológicas de la actividad de los canales de Ca2+, así como ensayos de flujo de Ca2+ radiactivo y métodos para investigar la señalización mediada por mensajeros movilizadores de Ca2+ específicos (IP3, cADPR y NAADP). También se proporcionan técnicas para modular y suprimir señales intra e intercelulares. Cada protocolo se completa con una lista de materiales necesarios, recetas detalladas de medios y reactivos y consejos para la resolución de problemas.

Se dedican capítulos específicos a las técnicas de señalización de Ca2+ en sistemas no mamíferos, como plantas, levaduras, pez cebra y Xenopus. También se incluyen métodos para evaluar la cinética de unión del Ca2+ y estrategias para desarrollar modelos matemáticos de señalización del Ca2+. Así pues, este manual es un completo recurso de laboratorio para bioquímicos, biólogos celulares y del desarrollo, y fisiólogos que estén utilizando o deseen ampliar su repertorio de técnicas de Ca2+.