PCR Troubleshooting and Optimization: La guía esencial

Título original:

PCR Troubleshooting and Optimization: The Essential Guide

Contenido del libro:

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una herramienta fundamental en la investigación científica y las pruebas clínicas. La PCR en tiempo real, que combina amplificación y detección en un solo instrumento, es un método rápido y preciso para la detección y cuantificación de ácidos nucleicos.

Aunque la PCR es una técnica muy potente, los resultados obtenidos sólo son válidos si se han empleado los controles adecuados. Además, se requiere una optimización adecuada de las condiciones de la PCR para la generación de datos específicos, repetibles, reproducibles y sensibles. Este libro analiza las estrategias para preparar controles y estándares eficaces para la PCR, cuándo deben emplearse y cómo interpretar la información que proporcionan.

Destaca la importancia de la optimización para la eficacia, la precisión y la sensibilidad de la metodología de la PCR y proporciona una guía esencial sobre cómo solucionar problemas de reacciones ineficaces. Expertos en PCR describen las técnicas de diseño y optimización, discuten el uso de controles apropiados, explican la importancia de las curvas estándar y exploran los principios y estrategias necesarios para la resolución eficaz de problemas.

El libro destaca la importancia de la preparación y la calidad de las muestras, el diseño de los cebadores, el control de los inhibidores, la prevención de la contaminación ambiental y de los amplicones, la optimización de la calidad y la concentración de los reactivos y la modificación del protocolo de termociclado para obtener una sensibilidad y especificidad óptimas. Además, en capítulos específicos se abordan la historia de la PCR, la elección de la instrumentación, las aplicaciones de la PCR en metagenómica, el análisis de fusión de alta resolución, las directrices MIQE y la PCR a escala de microlitros.

Las estrategias, trucos y consejos que contiene este conciso volumen permitirán al científico optimizar y solucionar eficazmente los problemas de una amplia gama de técnicas, como la PCR, la PCR con transcriptasa inversa, la PCR en tiempo real y la PCR cuantitativa. Será un libro esencial para cualquiera que utilice la tecnología PCR.