Experiments in Bacterial Genetics: A Laboratory Manual

Contenido del libro:

Las bacterias son potentes sistemas para la investigación genética. Son de crecimiento rápido y fáciles de propagar y mantener, y se han desarrollado muchas herramientas para sus análisis genómicos y su manipulación genética. El estudio de las bacterias y sus virus permitió descifrar el código genético y ha conformado nuestra comprensión de procesos biológicos fundamentales como la replicación, la transcripción y la traducción del ADN.

Este manual ofrece una colección de procedimientos experimentales para la investigación genética en bacterias. Describe métodos básicos para el aislamiento y la propagación de bacterias y fagos, la purificación de ADN genómico y plásmidos, y la introducción de ADN en bacterias. Se describen diversas estrategias para generar y confirmar mutaciones y para crear deleciones y fusiones génicas, utilizando tecnologías de intercambio alélico, transposición aleatoria, recombinación y CRISPR-Cas. Se ofrecen protocolos para la secuenciación y resecuenciación del genoma bacteriano, así como para el cribado de mutantes de alto rendimiento mediante la secuenciación de transposones.

Aunque en algunos de los protocolos se utilizan especies bacterianas específicas como Escherichia coli, Salmonella enterica, Vibrio cholerae y Staphylococcus aureus, las metodologías aquí descritas pueden adaptarse fácilmente para su uso con otras bacterias. Así pues, este manual constituye un valioso recurso para quienes deseen realizar experimentos genéticos con bacterias.